Метод картирования позволяет определить связывание белков с ДНК на уровне отдельных клеток

Связывание белков с ДНК имеет решающее значение для производства других белков, обеспечения выполнения всех необходимых процессов в клетках и для включения или выключения генов. Белки, которые связываются с ДНК, называются факторами транскрипции. Из-за динамического взаимодействия факторов транскрипции с ДНК сложно определить, где в геноме происходят взаимодействия между факторами транскрипции и ДНК.

Исследовательская группа из Кёльнского университета разработала метод DynaTag, который надёжно идентифицирует эти взаимодействия. Если ядра клеток неповреждены, DynaTag доказал свою эффективность при работе с небольшими объёмами образцов и даже на уровне отдельных клеток.

Исследование опубликовано в журнале Nature Communications под названием «DynaTag для эффективного картирования факторов транскрипции в образцах с низким содержанием материала и на уровне отдельных клеток».

«DynaTag превосходит существующие методы, такие как ChIP-seq и CUT&RUN, по чувствительности и разрешению результатов. Новый метод обеспечивает высокоточное картирование участков ДНК, где связываются факторы транскрипции», — говорит доктор Роберт Хэнсель-Хертш, главный исследователь Центра молекулярной медицины Кёльна (CMMC) и руководитель исследования.

В сложных организмах, таких как животные с различными тканями и типами клеток, трудно определить, где факторы транскрипции связываются с ДНК в геноме. По словам исследователей, этот новый метод, который позволяет анализировать отдельные клетки в различных тканях, может значительно улучшить наше понимание биологических процессов развития и механизмов заболеваний в физиологически значимых системах.

Кроме того, метод может определить активность факторов транскрипции в образцах тканей. Это важно для клинических исследований, поскольку образцы тканей обычно получают от пациентов для патологоанатомического исследования.

Исследователи продемонстрировали преимущества метода в исследовании мелкоклеточного рака лёгких на мышиной модели. Группа под руководством Хэнсель-Хертша изучала связывание факторов транскрипции в мелкоклеточных опухолях лёгких до и после химиотерапии.

«Уже было установлено, что после химиотерапии при мелкоклеточном раке лёгких активируются определённые сигнальные пути, способствующие резистентности или метастазированию. Однако не было известно, какие факторы транскрипции регулируют эти сигнальные пути», — говорит Хэнсель-Хертш.

«С помощью DynaTag мы смогли идентифицировать специфические факторы транскрипции, которые демонстрируют повышенное связывание с генами, принадлежащими к этим сигнальным путям после химиотерапии, и, вероятно, способствуют дальнейшему росту опухоли».

Таким образом, DynaTag устраняет фундаментальное техническое ограничение и открывает новые возможности для изучения эпигенетической регуляции в здоровье и болезнях, особенно в образцах, которые трудно получить, или в редких популяциях клеток.

Предоставлено Кёльнским университетом.

Источник

Другие новости по теме

Другие новости на сайте

Оставьте комментарий