Аналитическая методика позволяет по-новому взглянуть на старые образцы ДНК

Исследовательские институты по всему миру хранят ценную генетическую информацию, которая может помочь разгадать бесчисленные медицинские тайны. Однако из-за деградации ДНК со временем учёным сложно анализировать образцы ДНК старше 20 лет с помощью традиционных аналитических подходов.

Хотя современные технологии изменили возможности исследователей в изучении болезней, эти технологии в основном применялись к современным генетическим образцам. Возможность изучения генетических данных предыдущих десятилетий была крайне ограничена, что затрудняет понимание исследователями старых болезней и причин изменений в них с течением времени.

Адаптация методов

Исследователи из Чикагского университета адаптировали методы, изначально использовавшиеся для изучения древней ДНК из археологических образцов, и смогли извлечь генетическую информацию из медицинских образцов почти столетней давности.

Работа была представлена на ежегодном собрании Ассоциации молекулярной патологии (AMP) в 2025 году, которое проходило с 11 по 15 ноября в Бостоне.

Тестирование методики

Для проверки своей методики исследователи использовали образцы тканей из образцов колоректального рака, собранных между 1932 и 2023 годами. Исследователи выбрали колоректальный рак для изучения, поскольку за последние несколько десятилетий он стал значительно чаще встречаться среди молодых людей без чёткого объяснения причин. Сегодня 35-летний человек в два раза чаще заболевает колоректальным раком по сравнению с 35-летним человеком в 1985 году.

Исследователи изолировали опухолевую ткань из образцов, фиксированных формалином и залитых парафином, для извлечения ДНК. Они оптимизировали удаление парафинового воска и химических консервантов, чтобы максимизировать количество пригодной для использования ДНК.

Затем исследователи использовали специальные подходы, чтобы привести фрагменты ДНК в формат, пригодный для секвенирования. Они создали специальный конвейер, используя цифровые инструменты, обычно применяемые для анализа древней ДНК, чтобы сопоставить образцы с отсутствующей или повреждённой ДНК с человеческим геномом.

После проверки качества ДНК исследователи секвенировали геном с помощью полногеномного секвенирования и панели целенаправленного обогащения генов (OncoPlus) для поиска генетических мутаций, которые стимулируют рост опухоли. В обоих случаях они модифицировали протоколы, чтобы сохранить крошечные фрагменты ДНК, которые традиционно отбрасываются.

Наконец, они проанализировали нечеловеческую ДНК, обнаруженную в образцах тканей, чтобы идентифицировать бактерии, которые могли находиться в опухоли.

Доктор Александр Гуззетта, доктор медицинских наук, доктор философии, который руководил проектом вместе с исследователем древней ДНК Маанойсой Рагхаваном, доктором философии, отметил: «Когда мы анализировали бактериальную ДНК из тканей с раком толстой кишки, мы обнаружили не только нормальные кишечные микробы, но и виды бактерий, которые специфически связаны с раком толстой кишки».

Команда сейчас работает над усовершенствованием своих методов анализа, чтобы лучше понять этих бактерий и выяснить, как их присутствие могло измениться с течением времени.

Хотя команда Гуззетты в настоящее время сосредоточена на колоректальном раке, он надеется, что другие исследователи воспользуются этой работой для изучения других изменений болезней с течением времени.

«Здесь есть огромный потенциал для других групп, которые могут использовать эти подходы, чтобы разгадать первопричины, лежащие в основе меняющегося ландшафта современных заболеваний», — сказал Гуззетта.

«Этот подход может открыть возможность изучения того, как болезни развиваются десятилетиями, и пролить свет на то, как их биология менялась с течением времени».

Предоставлено Ассоциацией молекулярной патологии.

Источник

Другие новости по теме

Другие новости на сайте