Усиление сигнала позволяет обнаружить сотни скрытых партнёров по связыванию для рецептора белка крови

Количество различных гликопротеинов в крови сильно варьируется: на 10 наиболее распространённых гликопротеинов приходится 90% от общей массы. Найти белок, который не входит в эту десятку, — всё равно что искать Уолдо, если в коллекции остался только один экземпляр этого персонажа.

Такой разброс в концентрации белков называется динамическим диапазоном, и из-за него учёным сложнее идентифицировать менее распространённые белки и соответствующие им рецепторы.

Учёные из Sanford Burnham Prebys и их коллеги из Института исследований Скриппса опубликовали в журнале Nature Communications результаты исследования, в котором представлена стратегия выявления менее распространённых белков, связывающихся с особым типом рецептора, называемого эндоцитарным лектином, а именно с маннозным рецептором Mrc1 (также известным как CD206 и MMR). Этот подход позволил исследовательской группе обнаружить сотни партнёров по связыванию, которые вместе предсказывают роль Mrc1 в нашем здоровье.

Чтобы усилить сигнал и преодолеть шум от множества белков, появляющихся на разных уровнях, исследователи использовали прототип маннозосвязывающего лектина Concanavalin A (ConA), чтобы сначала обогатить те белки крови, которые имеют множественные связи маннозы.

«ConA и Mrc1 обладают одинаковыми свойствами связывания с маннозой; однако Mrc1 недоступен в виде столь же активного рекомбинантного белка», — сказал Маянк Сарасвэт, доктор философии, старший научный сотрудник Sanford Burnham Prebys и соавтор исследования.

«Мы выделили белки, которые связываются с ConA из плазмы нормальных мышей и мышей, у которых отсутствует Mrc1», — сказал Сарасвэт. «Сравнение показало повышенную чувствительность и селективность, что позволило идентифицировать лиганды рецептора по мере их накопления в крови при отсутствии Mrc1».

Mrc1 поддерживает концентрацию различных критически важных белков плазмы крови в здоровом диапазоне. Он делает это, связываясь с белками, которые были посттрансляционно модифицированы маннозой, иногда называемыми маннозилированными белками. Связывание маннозилированных белков с Mrc1 инициирует механизм эндоцитарной очистки, который ограничивает период полураспада лигандов Mrc1 и их количество в циркуляции.

После сравнения белков в крови нормальных мышей и мышей, у которых отсутствует Mrc1, команда обнаружила, что накопление 244 маннозилированных белков плазмы крови увеличилось в два и более раза по сравнению с количеством, обнаруженным у нормальных мышей, из-за того, что Mrc1 больше не контролирует уровни.

Затем учёные более подробно изучили вновь идентифицированные лиганды. Они использовали биоинформатику для анализа и изображения этих сотен белков по их функциям.

«Мы заметили, что многие из белков играют очень важные роли», — сказал Джейми Март, доктор философии, профессор Sanford Burnham Prebys и старший и соответствующий автор рукописи. «Например, ферменты, преобразующие ренин и ангиотензин, являются основными регуляторами артериального давления».

Исследователи углубились в изучение восьми из этих белков, влияющих на кровяное давление, воспаление, функцию органов и сепсис.

«Мы наблюдали нарушение нормальной физиологии и функций, которое было полностью предсказуемо на основе идентичности маннозилированных белков, накапливающихся в организме, с дополнительным эффектом отслеживания заболевания по хронологическому возрасту», — сказал Март.

В случае сепсиса мыши, у которых отсутствовал Mrc1, погибали от этого заболевания быстрее.

«Когда мы посмотрели на образцы крови пациентов с сепсисом, мы обнаружили, что существует разница в белках, которые накапливались по сравнению с мышами с дефицитом Mrc1», — сказал Сарасвэт. «Однако, когда мы сравнили пути, контролируемые этими белками, половина из тех, что были активированы у пациентов с сепсисом, также были активированы при дисфункции Mrc-1».

«Чтобы понять роль, которую играют гликозидные связи в здоровье и болезнях, модифицируя обилие и активность гликопротеинов крови, нам необходимо расшифровать этот новый язык, охватывающий гликозилирование белков, выявлять аномалии и определять, как эта система преобразуется в организме, влияя на различные физиологические функции», — сказал Сарасвэт.

Источник

Другие новости по теме

Другие новости на сайте